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生化試劑-CD4細胞分選磁珠

描述:生化試劑-CD4細胞分選磁珠可用于對細胞進行磁性標記。標記后,將細胞懸液加載到分選柱上,該柱放置在含分選器的磁場中。 磁性標記的CD4+細胞被保留在柱內。 · 高磁珠結合力, 簡便、快捷,高純度、高得率、高活率

更新時間:2024-06-18
產品型號:
廠商性質:經銷商
詳情介紹

產品信息 

CD4分選磁珠

生化試劑-CD4細胞分選磁珠 可用于對細胞進行磁性標記。標記后,將細胞懸液加載到分選柱上,該柱放置在含分選器的磁場中。 磁性標記的CD4+細胞被保留在柱內。未標記的細胞貫穿其中而被去除。將分選柱從磁場中移除之后,洗脫磁性標記的CD4+細胞作為陽性選擇的細胞。

 · 高磁珠結合力 

·  簡便、快捷

 ·  高純度、高得率、高活率


使用方法

試劑和儀器要求

1.緩沖液: (pH7.2 PBS、0.5% BSA、2 mM EDTA,2-8C)。

2.分選柱和分選器

3.(可選)用于流式細胞術分析的熒光偶聯CD4抗體。

4.(可選)PI(碘化丙啶)或7-AAD 用于流式細胞術排除死亡細胞。

5.(可選)預分離過濾器用于去除細胞團塊。

 


操作步驟

一、樣本準備

當處理抗凝的外周血液時,應通過密度梯度離心法分離外周血單核細胞(PBMC)。

在處理組織時,用標準的制備方法制備單細胞懸浮液。

二、磁珠標記

1.細胞計數。

2.300g 離心10min,去除上清。

3.每 10?細胞,用80μL緩沖液重懸。

4.每 10?細胞,用20μLCD4磁珠混勻。

5.(2-8)℃冰箱避光孵育15min(如果是在冰上孵育,需要增加孵育時間;如果是常溫孵育,會增加非特異結合)。

6.(可選)加入染色抗體,在2-8℃避光孵育5分鐘。

7.每10?細胞,加入1-2mL緩沖液洗滌,300g離心10min,棄上清。

8.用 500μL 緩沖液重懸細胞。

三、磁性分選

1.將分選柱放置在分選器的磁場中。

2.將分選柱中加入適量緩沖液,充分濕潤分選柱(xM: 500μL;xL: 3 mL)

3.將細胞懸液加到分選柱中。

4.結合磁珠的細胞會被吸附到分選柱上,沒有結合的細胞會順著液體流下來。加適量的緩沖液,待液體全部流盡,再加入適量緩沖液,一共洗3次。收集總流出物。這是未標記的細胞。(xM: 3X500μL;xL: 3x3mL

5.將分選柱從分選器中取出,并將其放在合適的收集管上。

6.加適量的緩沖液到分選柱中,迅速用塞子推下,得到就是目的細胞。(xM: 1mL;xL: 5 mL)

7.(可選)為了提高標記細胞的純度,洗脫部分可以在第二個xM或xL柱上富集。使用新的分選柱重復步驟1至6中描述的磁選過程。



保存方法

2-8℃條件下避光保存,請勿冷凍。有效期見試劑外標簽。



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