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NK細胞分選試劑盒

描述:NK細胞分選試劑盒可用于從小鼠脾臟單細胞懸液中分離未經標記的NK 細胞。非NK細胞(T細胞、DC 細胞、B細胞、粒細胞、巨噬細胞、紅系細胞)被生物素化的抗體和識別生物素的磁珠標記通過去除這些非NK細胞,從而得到高純度的NK細胞。

更新時間:2024-06-18
產品型號:92-01-348
廠商性質:經銷商
詳情介紹

NK細胞分選試劑盒可用于從小鼠脾臟單細胞懸液中分離未經標記的NK 細胞。非NK細胞(T細胞、DC 細胞、B細胞、粒細胞、巨噬細胞、紅系細胞)被生物素化的抗體和識別生物素的磁珠標記通過去除這些非NK細胞,從而得到高純度的NK細胞。


其分選原理為:用生物素結合的單克隆抗體混合物(作為一級標記試劑)和與磁珠結合的抗生物素單克隆抗體(作為二級標記試劑)對非靶細胞進行間接磁性標記。磁性標記的非目標細胞在分選器的磁場中被保留在分選柱中,而未標記的NK 細胞則通過分選柱流出。


<strong>NK細胞分選試劑盒</strong>



試劑和儀器要求

緩沖液(pH7.2 PBS,0.5% BSA、2mM EDTA, 2~8℃)

分選柱和分選器。

(可選)熒光偶聯的抗體用于流式分析。

(可選)PI或7-AAD可以用于流式分析中排除死細胞。

(可選)死細胞清除試劑盒用于死細胞的清除。

(可選)預分離過濾器去除細胞團塊。


操作步驟

一、樣本準備

使用手動方法或組織解離器制備脾臟單細胞懸液。


二、磁珠標記

1.細胞計數。

2.300xg離心10分鐘。去除上清。

3.每107個細胞總量使用 40μL緩沖液重懸。

4.每107個細胞總量添加 10μLNK細胞生物素抗體混合物。

5.混勻,2-8℃孵育  5分鐘。

6.每107個細胞加入 2mL緩沖液洗滌細胞,300xg離心10分鐘,去上清。

7.每107個細胞添加 80μL 緩沖液。

8.每107個細胞添加 20μL抗生物素磁珠。

9.混勻,2-8℃孵育 10分鐘。

10.(可選)添加染色抗體。

11.進行細胞分選步驟。


三、細胞分選

xM或xL分選柱進行細胞分選

1.將分選柱置于相對應的分選器中。

2.用適當體積的緩沖液潤洗分選柱(xM: 500 μL; xL: 3mL)

3.將細胞懸液轉移至分選柱中。收集含有未標記細胞的流出液,即 NK細胞。

4.加適量的緩沖液,收集總流出物,并與步驟 3中的流出液混合,這是NK細胞。( xM: 500 μL;xL: 3mL)

5.(可選 )將分選柱從分選器中取出,并將其放在合適的收集管上。加適量的緩沖液到分選柱中,迅速用塞子推下,得到就是磁性標記的非NK細胞。( xM: 1mL;xL: 5mL)

儲存溫度

2-8℃避光保存,請勿冷凍。有效期見試劑外標簽。


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