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利用Solentim STUDIUS細胞成像分析儀評估細胞IgG產率的操作方法

 更新時間:2024-06-11 點擊量:113

  摘要:本實驗方法旨在介紹如何使用Solentim STUDIUS細胞成像分析儀進行細胞IgG 產率評估。本方法詳細描述了從鋪板到生長過程中的產率分析、排名和選擇的全過程,以及STUDIUS在細胞系開發中的應用價值。

關鍵詞:Solentim STUDIUS,細胞成像分析儀,細胞IgG產率,實驗方法

在生物制藥領域,細胞培養技術已成為生產重組蛋白類藥物的關鍵步驟。其中,細胞IgG產率的評估對于優化生產過程和提高產量具有重要意義。Solentim STUDIUS細胞分析儀作為一種數字化時代的實驗室儀器,它具備樣本追蹤、自動分類、即時分類、避免人為錯誤和自動創建單克隆性報告等功能,為細胞IgG產率評估提供了高效、準確的解決方案。

使用Solentim STUDIUS細胞分析儀進行細胞IgG產率評估的詳細實驗方法步驟如下:

一、實驗準備

1. 實驗材料:細胞培養板、細胞懸液、IgG檢測試劑盒。

2. 實驗儀器:Solentim STUDIUS細胞分析儀、細胞培養箱、離心機、酶標儀。

3. 細胞培養板的準備:選擇適合細胞生長的細胞培養板,并根據實驗需求進行滅菌處理。

4. 細胞懸液的準備:從細胞庫中取出目標細胞株,進行復蘇和擴增,調整細胞密度至所需的接種密度。

3. IgG檢測試劑盒的準備:根據試劑盒說明書,準備所需的試劑和標準品。

4. Solentim STUDIUS細胞分析儀的準備:開啟儀器,進行系統自檢和校準。

單細胞鋪板設備

二、細胞鋪板

1. 將準備好的細胞懸液按照預定的接種密度鋪板到細胞培養板中,每孔加入適量的細胞懸液。

2. 輕輕搖動培養板,使細胞均勻分布。為保證細胞鋪板均勻,可以使用Solentim VIPS進行全自動鋪板驗證。

3. 將細胞培養板放入細胞培養箱中,根據細胞生長需求設定適宜的培養條件(如溫度、濕度、CO2濃度等)。

三、細胞培養與成像分析

1. 在細胞培養過程中,根據實驗設計的時間點,使用Solentim STUDIUS細胞分析儀對細胞進行成像分析。

2. 在成像分析前,根據儀器操作手冊進行參數設置,包括成像區域、曝光時間、分辨率等。

3. 將細胞培養板放入STUDIUS儀器中,啟動成像分析程序。

4. 儀器將自動對每個孔進行成像,并記錄細胞的形態、生長狀態等數據。

5. 成像分析完成后,儀器將生成彩色節點,代表細胞生長過程中的關鍵時間點,實現數據跟蹤和審計追蹤。


單克隆細胞篩選


四、IgG產量檢測

1. 根據IgG檢測試劑盒說明書,收集細胞培養上清液。

2. 將上清液進行適當稀釋,以便于酶標儀檢測。

3. 使用酶標儀,根據試劑盒提供的檢測方法,對上清液中的IgG含量進行定量檢測。

4. 記錄檢測結果,包括吸光度值、IgG濃度等。

五、數據處理與分析

1. STUDIUS成像分析結果與IgG產量檢測結果進行關聯,建立細胞形態、生長狀態與IgG產率之間的關系。

2. 利用STUDIUS的數據分析功能,對細胞克隆進行排名和選擇,篩選出高IgG產率的細胞克隆。

3. 分析數據,生成報告,為后續實驗和生產過程提供參考。

六、實驗結束

1. 關閉Solentim STUDIUS細胞分析儀,進行日常維護和清潔。

2. 處理實驗產生的廢物,如廢棄的細胞培養板、試劑等。

3. 記錄實驗過程中的關鍵參數和結果,整理實驗數據。

通過以上詳細實驗方法步驟,使用Solentim STUDIUS細胞分析儀進行細胞IgG產率評估,可以實現從鋪板到生長過程中的產率分析、排名和選擇的全過程,提高實驗的準確性和效率。

七、實驗結果與分析

1. 產率分析結果:STUDIUS細胞分析儀可實時追蹤細胞生長過程,通過彩色節點記錄關鍵時間點的數據。通過對細胞形態、生長速度等參數的分析,可初步評估細胞IgG產率。

2. IgG產量檢測結果:酶標儀檢測結果顯示,不同細胞克隆的IgG產量存在較大的差異。將檢測結果與STUDIUS成像分析結果進行關聯,可進一步優化細胞克隆的選擇。

3. 數據處理與分析結果:利用STUDIUS的數據分析功能,對細胞克隆進行排名和篩選。結合IgG產量檢測結果,篩選出高IgG產率的細胞克隆,為后續生產過程提供優質種子。

八、討論與總結

本實驗方法使用Solentim STUDIUS細胞分析儀進行細胞IgG產率評估,實現了從鋪板到生長過程中的產率分析、排名和選擇的全過程。STUDIUS具備的數據跟蹤、審計追蹤和多級密碼保護用戶訪問等功能,為細胞系開發提供了可靠工具。實驗結果表明,STUDIUS在細胞IgG產率評估方面具有較高的準確性和效率。

在使用STUDIUS進行細胞IgG產率評估的過程中,應注意以下幾點:

1. 細胞鋪板密度:根據細胞類型和生長特性,選擇適當的鋪板密度,以保證細胞正常生長和產率評估的準確性。

2. 成像分析時間點:根據細胞生長速度和產率變化,合理設置成像分析時間點,以捕捉關鍵時期的細胞狀態。

3. 數據關聯與分析:將STUDIUS成像分析結果與IgG產量檢測結果進行關聯,綜合評估細胞IgG產率。利用STUDIUS的數據分析功能,優化細胞克隆的選擇。

使用Solentim STUDIUS細胞成像分析儀進行細胞IgG產率評估的方法,為生物制藥領域提供了高效、準確的實驗手段。通過對細胞克隆的產率分析、排名和選擇,有助于提高重組蛋白類藥物的生產效率和質量。

蘇州阿爾法生物提供的STUDIUS通過整合來自VIPS PRO單細胞鋪板、Cell Metric®單克隆驗證和克隆生長監測以及ICON™的IgG產率評估,幫助科學家能夠更快、更自信地做出決策。該軟件平臺根據用戶定義的參數自動、即時地分析數據,縮短了克隆的排名和選擇所需的時間。

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